Точное определение группы крови цоликлонами

Содержание

Точное определение группы крови цоликлонами

Точное определение группы крови цоликлонами

Многие люди хотят знать, какая группа крови у них. Такой показатель является очень важным для каждого из нас. Может случиться разная ситуация, поэтому обязательно нужно ее знать. Во время операции и при тяжелых родах, возможно, понадобиться срочное переливание крови, поэтому чтобы не терять драгоценные минуты нужно заранее определить свою группу.

Существует в лабораторной практике определение группы крови при помощи цоликлонов. Они являются моноклинальными антителами, которые синтезировали из крови стерильных мышек с помощью генной инженерии.

Их применяют для определения группы крови в системе АВО. Обычно цоликлоны применяют вместо обычных сывороток, так как реакция агглютинации и высокая их активность ускоряет процесс выявления группы крови.

Главные антитела называются:

  • анти-А;
  • анти-В;
  • анти-0;
  • анти-АВ.

Именно с их помощью находят резус-фактор и группу крови.

Проведение определения группы и резуса

Таким способом определение группы производят в лабораторных условиях. Температурный режим в лаборатории обязаны поддерживать от + пятнадцати до +двадцати пяти 0С.

Освещение помещения необходимо сделать довольно ярким. Реагенты необходимо сохранять в плотно закупоренном виде, так как при высыхании их работоспособность сильно понижается.

Цоликлоны с хлопьями и мутным содержимым нельзя использовать для определения группы.

При проведении анализа нужно использовать разные пипетки. Применяется специальная тарелочка или планшет с белой поверхностью и отличными смачивающимися качествами. По 1 серии реагентов анти-А и анти-В можно применить в анализе, так как у них отличная активность и авидность.

Планшет отмечают надписями антител. На поверхность с соответствующей надписью капают 0,1 мл цоликлонов. Оттенки желтого и розового цветов присутствуют в анти-А реагентах, синим, окрашен анти-В.

Около антител капают капельку крови, а затем смешивают ее стеклянной палочкой или углом предметного стекла. Когда нужно смешать следующую пару необходимо обязательно хорошо промыть и вытереть насухо.

Планшетку начинают слегка раскачивать около 2,5 минуты, чтобы агглютинации проходил в правильном режиме. Потом смотрят результат. Наблюдают за процессом без каких-либо вмешательств и дополнительных предметов. Антитела отлично видны лаборанту. Процесс их слияния прекрасно выявлен в виде объемных хлопьев. При определении не склеивания моноклинальных антител они окрашиваются в красный цвет.

Список определения группы крови с помощью этого анализа:

  1. Когда нет склеивания ни с анти-А, ни с анти-В, то такая кровь имеет 1 группу.
  2. Только реагент анти-А взаимодействует с эритроцитами, то — это 2 группа.
  3. Клетки крови соединяются только с анти-В, то такая группа 3.
  4. Если оба антитела соединяются с эритроцитами, то — это группа 4.

При этой проверке могут провести дополнительное исследование, смешивая изотонический раствор хлорида натрия и кровяных телец.

Определение резус-фактора

На поверхность планшетки капают очень большую каплю реагента анти-D, а рядышком очень маленькую капельку крови. Все это смешивают и ждут результата. Когда происходит агглютинация, значит, кровь с положительным резусом, а если ее нет, то резус-фактор — отрицательный.

Факторы, влияющие на отсутствие соединения антител с эритроцитами

Существуют определенные причины, по которым агглютинация может остаться незамеченной:

  • температура в помещении выше 25 0С, поэтому реакция запоздалая или очень слабо выражена;
  • может быть, неправильное соотношение антител и крови, капля их должна превышать кровяную в восемь раз;
  • в эритроцитах слабая реакция склеивания;
  • антитела неправильно хранятся или срок их действия уже истек.

Действия при ошибочной установке склеивания

  • появляются монетные столбики, необходимо добавить физраствор;
  • температура в помещении довольно низкая, поэтому эритроциты соединяются в зерна;
  • эритроциты могут соединяться со всеми сыворотками;
  • если долгое время процесс взаимодействует с воздухом;
  • пробирки маркированы нечетко, тогда лучше провести реакцию с другими сыворотками.

Современная медицина шагнула далеко вперед. Лабораторные исследования проводятся суперсовременными реагентами и приборами. Когда возникает непредвиденная ситуация врачи могут в быстрые сроки определить не только группу крови, но и резус. 

Конечно, все люди обязаны знать, какая кровь и резус его ребенка. Люди, имеющие наследственные заболевания, связанные с кровью должны иметь специальные визитки, на которых указана группа и резус крови.

 Посещайте почаще врачей и не бойтесь их, ведь всегда запущенная болезнь лечится дольше, чем ее можно предотвратить на ранних стадиях. В наши дни своевременное обращение к доктору может спасти вам жизнь.

Источник: https://kodkrovi.ru/analizy-krovi/analiz-na-opredelenie-vashego-rezusa-i-gruppy/

Цоликлоны для определения группы крови

Точное определение группы крови цоликлонами

Определение группы крови по цоликлонам — это простая процедура, которая проводится в лабораторных условиях. В ее основе лежит химическая реакция между моноклональными сыворотками и агглютиногенами.

В результате можно узнать не только группу крови, но и ее резус-фактор, и эти методики считаются наиболее простыми, точными и доступными. Вещества продаются в удобных флаконах разного объема и оснащены дозатором-капельницей.

Проведение анализа занимает несколько минут, благодаря чему в лабораториях можно в течение дня обработать огромное количество проб.

Что такое цоликлоны?

Цоликоны — это моноклональные антитела, которые находятся в солевом растворе.

Вещество получило свое название в честь его изобретателей — Центральный Ордена Ленина Институт, сегодня переименованный в Гематологический научный центр. Они представлены жидкостью, которая продается во флаконах объемом 5 и 10 мл.

Это универсальный реагент для гематологических исследований, поскольку позволяет определить группу крови как в системе АВ0, так в системе резус.

Выделяют 3 основные разновидности цоликлонов:

  • анти-А — жидкость красного цвета;
  • анти-В — синее вещество;
  • анти-D — прозрачный реагент для определения резус-фактора.

Для определения группы крови применяются цоликлоны анти-А и анти-В. Они вступают в биохимические реакции с агглютиногенами, которые расположены на поверхности эритроцитов — красных кровяных клеток.

Эритроциты группы крови А содержат агглютиноген А, который прореагирует с цоликлоном анти-А. Аналогично определяется содержание агглютингена В.

Положительным результатом реакции считается склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок.

СПРАВКА! Агглютинация — это склеивание веществ. Агглютиногенами называются соединения, которые находятся на поверхности эритроцитов и вызывают их склеивание при соединении несовместимых групп крови.

Процедура определения группы крови

Процедура, как определить группу крови с помощью цоликлонов, очень проста и проводится за несколько минут. Для нее потребуется нативная («живая») капиллярная кровь, допускается наличие в ней консерванта. Также понадобится планшет — плоская поверхность из стекла, на которой будет происходить реакция. Процедуру проводят по определенному алгоритму:

  1. нанести две большие капли цоликлонов на поверхность планшета (обычно реагент анти-А находится слева, а анти-В — справа);
  2. добавить небольшие капли крови, которые по объему будут в 10 раз меньше реагентов;
  3. аккуратно двигать планшет, чтобы кровь смешалась с раствором, но две капли не соединились друг с другом;
  4. через несколько минут наблюдать результаты.

Для установления группы подойдет и кровь с добавлением консерванта. Однако простота методики позволяет проводить ее на месте непосредственно после взятия биологического материала. Достаточно набрать небольшое количество капиллярной крови из пальца, чтобы ее полностью хватило для проведения анализа.

Анализ проводится на специальном стеклянном планшете

Расшифровка результатов

Спустя несколько минут после соединения реагентов можно наблюдать результаты. Полное смешивание жидкостей говорит об отсутствии реакции, а агглютинация проявляется появлением красных сгустков в прозрачном растворе. Это эритроциты, которые склеиваются между собой при контакте с несовместимыми моноклональными антителами. Далее можно расшифровать результаты по простому алгоритму:

А еще советуем почитать:Что такое группа крови и резус-фактор (таблица)

  • 1 группа (0) — агглютинация отсутствует в обеих каплях, поскольку на эритроцитах отсутствуют агглютиногены;
  • 2 группа (А) — реакция наблюдается в первой капле с цоликлоном анти-А;
  • 3 группа (В) — во второй капле происходит склеивание эритроцитов при контакте с реагентом анти-В;
  • 4 группа (АВ) — появление красного осадка в обеих каплях.

Четвертая группа крови считается самой редкой, поэтому при появлении агглютинации в обеих лунках анализ проводится повторно. Кроме того, кровь необходимо добавить в обычный физиологический раствор, чтобы исключить вероятность опасных заболеваний. У здорового человека она никак не прореагирует с физраствором, а эритроциты не будут склеиваться.

Полезные советы

Определение группы и резус-фактора крови с использованием цоликлонов считается одним из самых простых и доступных методов, поэтому широко применяется в лабораториях разного уровня. Кроме того, такой анализ дает достоверные результаты.

Однако в некоторых случаях они бывают ложными, а причиной этому становится несоблюдение нескольких правил.

Простая инструкция по применению цоликлонов и работа с ними позволит избежать получения недостоверных результатов и необходимости проводить исследование заново:

  • хранить реагенты в холодильнике, при температуре от 2 до 8 градусов, а распечатанный флакон использовать в течение 30 суток;
  • исследования проводятся при комнатной температуре, а в слишком жарком помещении рекомендуется периодически охлаждать стеклянную поверхность планшета;
  • обозначать на планшете разные цоликлоны маркером, поскольку их цвет после добавления крови быстро исчезает;
  • соблюдать правильные пропорции реагентов: если крови будет слишком много, реакция агглютинации эритроцитов будет мало выражена;
  • не допускать смешивания капель жидкости, в которых уже присутствуют разные типы цолкиклонов — в таком случае реакцию придется проводить заново;
  • обозначать окончательный результат не менее, чем через 3 минуты после начала реакции.

Важно также соблюдать последовательность действий во время анализа. Так, если стеклянную поверхность не раскачивать, даже при отсутствии реакции склеивания эритроциты будут расположены в краевой зоне капли. Это может стать причиной неправильной интерпретации результатов.

При определении группы крови необходимо учитывать острые и хронические заболевания, которые наблюдаются у пациента. При патологиях печени и органов кроветворной системы, а также болезнях, которые протекают по типу сепсиса, может происходить явление патагглютинации. Эритроциты будут склеиваться даже при контакте с обычным физиологическим раствором.

Напротив, при лейкозе кровяные клетки не отреагируют на присутствие антител, и агглютинация не произойдет.

Цоликлоны — это важные реагенты, которые используются ежедневно в гематологических лабораториях. Они позволяют быстро и безошибочно определить группу крови и ее резус без дополнительного оборудования и специальных навыков. Однако важно выполнять простой алгоритм, чтобы результаты анализа действительно были достоверными.

Источник: https://icvtormet.ru/krov/coliklony-opredeleniya-gruppy

Определение группы крови с помощью цоликлонов

Точное определение группы крови цоликлонами
Рубрика: анализ крови

19.11.2017   ·   : к записи Определение группы крови с помощью цоликлонов отключены   ·  На чтение: 5 мин   ·  Просмотры:

Определение группы крови – обязательный анализ, который проходят все люди, поступающие на стационарное лечение. Без этого параметра специалист не сможет назначить грамотное лечение, а также отправить пациента на любое хирургическое вмешательство.

Провести определение группы крови с помощью цоликлонов сможет любой лаборант, если у него есть необходимые инструменты и реагенты. При этом использование цоликлонов является достаточно точным исследованием и крайне редко показывает ошибочные результаты.

Что это такое?

Цоликлон – антитело, которое появляется в результате генной инженерии. Обычно оно получается вследствие подсаживания специальных веществ в организм мыши.

Он начинает вырабатывать эти антитела, которые и синтезируются из асцитной жидкости животного. Ее и используют для изучения группы крови человека.

По своей морфологии, цоликлоны схожи с иммуноглобулинами класса М – антителами острой фазы. Механизм их действия работает за счет комплекса антиген-антитело.

Препараты цоликлонов

На сегодняшний день во всех лабораториях применяют 3 различных типа цоликлонов. Все они стандартизированы и прошли исследования. Выделяют цоликлоны – анти-А, анти-В, анти-АВ.

Каждый их них является специфическим, вызывают различные реакции. Из-за этого они вызывают развитие иммунной реакции.

Все препараты для определения группы крови выпускаются в специальных ампулах либо же флаконах, в которых содержится 5/10 мл раствора. Препарат имеет специальную окраску, которая помогает определить реагент.

  1. Красный цвет – во флаконе находится цоликлон анти-А.
  2. Синий цвет – во флаконе находится цоликлон анти-В.
  3. Не имеет окраски – комбинированный цоликлон анти-АВ. При этом в некоторых случаях его называют анти-Д.

Определение группы крови с помощью цоликлонов

Способ определения группы крови

Используя цоликдонов позволяет быстро и точно определиться группу крови чедовека. Преимуществом такого исследования можно назвать то, что самого человека не нужно готовить к исследованию – любая кровь пригодна для изучения.

Перед тем, как приступить к исследованию, специалист берет небольшую пластинку. На ней высечены лунки, в которых присутствуют цоликлоны. В каждое углубление специалист добавляет по одной капле воды. При этом качество жидкости не влияет на точность результатов.

После этого специалист делает укол в палец и забирает определенное количество капиллярной крови. При этом для определения группы крови может использоваться кровь как с консервантом, так и без его использования.

Учитывайте, что для получения точного результата необходимо четко следовать всем правилам. Важно, чтобы соблюдались параметры окружающей среды: помещение должно быть светлым, проветриваемым, с определенным уровнем влажности.

Также следите, чтобы кровь была взята правильно, а реагенты – с нормальным сроком годности и не вскрытыми.

После этого специалист в каждое углубление, куда вы заранее добавили каплю жидкости, опускается 1 капля крови пациента. Специалист берет стеклянную палочку, после чего тщательно перемешивает компоненты.

Это необходимо для того, чтобы растворить цоликлоны. После этого на специальную планшетку наносятся по 1 капле каждого антитела на расстоянии нескольких миллиметров друг от друга. При этом необходимо использовать стеклянную палочку, которая не влияет на протекание реакции.

Располагать реагенты лучше всего следующим образом – А, В, АВ. После каждой капли размещайте небольшое количество человеческой крови, после чего постепенно перемешивайте компоненты. Следите, как происходит реакция.

Первые результаты от проведенного исследования вы сможете оценить уже через 5-10 секунд после начала анализа. Обычно уже спустя это время лаборант делает вывод о наличии либо отсутствии склеившихся эритроцитов. Такой процесс называется агглютинацией.

Именно это позволяет сделать вывод об определенной группе крови человека. Если же никаких изменений не происходит, то пациент отправляется на дополнительные исследования и диагностичесаие исследования.

Интерпретация результатов

Определение группы крови с помощью цоликлонов основано на визуальном исследовании. Врач должен определить, как жидкость взаимодействует с веществом. Возможно протекание множество различных реакций.

Расшифровка выглядит следующим образом:

  1. Кровь относится к 1 группе, если во всех образцах крови отсутствует реакция.
  2. Кровь относится ко 2 группе, если кровяные клетки начали взаимодействовать с цоликлоном анти-А.
  3. Кровь относится к 3 группе, если эритроциты склеились с цоликлоном анти-В.
  4. Кровь относится к 4 группе, если кровь взаимодействует со всеми веществами.

Для обучения максимально точных и правильных результатов, а также для определения резус-фактора, во все биоматериалы добавляют цоликлоны АВ. Если же кровь сворачивается, врач делает вывод о положительном резусе, если изменений не происходит – об отрицательном.

Что нужно помнить при проведении анализа?

Чтобы определение группы крови с помощью цоликлоном было максимально точным и достоверным, необходимо придерживаться следующих условий:

  • Реагенты необходимо хранить при 2-8 градусов тепла. При этом они должны быть плотно закрыты в специальных флаконах.
  • Категорически запрещено использовать цоликлоны с истекшим сроком годности. В таком случае препарат теряет эффективность, может показать совершенно неправильный результат.
  • Проводить исследование необходимо в светлом и проветриваемом помещении, которое защищено от грязи, пыли и других внешних факторов.
  • Обязательно соблюдайте пропорции при нанесении реагентов и биоматериала на поверхность планшетки.
  • Не допускайте, чтобы в одной капли крови смешивались реагенты разных групп. В противном случае вам придется полностью переделывать анализ.
  • Не стоит использовать слишком большое количество крови, так как реагент может не прореагировать с каждой клеткой.

Длительность анализа составляет не менее 3 минут. Если же врач не может сделать однозначный вывод об конкретной группе крови, исследование может затянуться на 5 минут.

По прошествии 10 минут кровь начинает подсыхать, сами эритроциты – выпадают в осадок. Такому результату доверять не стоит.

Что может повлиять на результат?

При проведении определения группы крови с помощью цоликлонов необходимо учитывать, что эти организмы крайне зависимы от условий окружающей среды.

Именно по этой причине для получения точного результата необходимо придерживаться всех правил гигиены и температурного режима. Учитывайте, что помещение, в которой проводится исследование, должно быть сухим и чистым, все компоненты крови не должны контактировать между собой.

Даже если самая малая капля крови смешается в другим материалом, жидкость начинает менять свои характеристики – это значительно осложняет процесс проведения анализа.

Кроме того, при проведении исследования необходимо учитывать состояние организма. Возможна панагглютинация крови – состояния, когда эритроциты оседают даже при контакте с физраствором.

Обычно такое состояние возникает могут вовсе не реагировать на раздражители – чаще всего такое встречается у людей, больных лейкозом, и у младенцев.

Учитывайте, что в организме одного человека могут находится разные типы эритроцитов. Такое явление появляется у пациентов, которые в прошлом перенесли серьёзное переливание крови, пересадку костного мозга. В таком случае определение группы крови возможно только при наличии специального оборудования.

Определение группы крови с помощью цоликлонов – наиболее простой, но при этом точный метод определения группы крови. Если специалист будет соблюдать все правила и требования, человек сможет получить точный и безошибочный результат. В таком случае вероятность ошибки крайне мала.

Источник: https://1analiz.ru/opredelenie-gruppy-krovi-s-pomoshhyu-coliklonov.html

Определение групп крови с помощью цоликлонов

Точное определение группы крови цоликлонами

Определение группы эритроцитарных антигенов и резус-фактора давно стало одним из обязательных исследований для большинства пациентов, поступающих на стационарное лечение. Его проведение возможно на любом уровне оказания медицинской помощи при условии наличия необходимых реагентов и инструментов.

Обычно, определение группы проводится с помощью стандартных сывороток, хотя, конкуренцию ему составляет еще один метод, сходный по методике проведения с эталонным – использование цоликлонов.

Цоликлон – моноклональное антитело, образующееся путем генной инженерии. Чаще всего, для его получения используют мышей – животному вводят специальный антиген, а после получают асцитную жидкость грызуна, в которой и содержатся указанные антитела.

Морфологически, они относятся к иммуноглобулинам класса М, т.е. антителам острой фазы. Механизм действия их обусловлен образованием комплекса антиген-антитело, где в качестве антигена выступают некоторые молекулы (в данной ситуации – белки, определяющие группу крови и ее резус), расположенные на мембране клетки.

Какие существуют препараты цоликлонов

В настоящее время, в лабораторной диагностике используется 3 типа стандартных цоликлонов – анти-А, анти-В и анти-АВ. Каждый из них вступает в реакцию со специфичным для него антигеном, обуславливая развитие иммунной реакции.

Эти препараты выпускаются в виде ампул или флаконов, содержащих 5 или 10 мл раствора антител. Все они имеют специфическую окраску, по которой и проводится определение каждого типа:

  • анти-А окрашен в красный цвет;
  • анти-В выпускается в виде раствора синего цвета;
  • комбинированный цоликлон анти-АВ (или анти-D) специфической окраски не имеет.

Цоликлон анти-АВ может быть модифицированным и использоваться для определения резус фактора.

Алгоритм исследования достаточно прост, специальной подготовки к исследованию от пациента не требуется.

Определение группы может проводиться в нативной крови как с использованием консерванта, так и без него. Для исследования берут капиллярную кровь из пальца пациента.

Обязательно соблюдать условия окружающей среды для получения достоверной информации: анализ проводится в хорошо освещенном помещении с умеренной влажностью и температурой не ниже 20 градусов.

Кроме того, следует удостовериться, что кровь была взята у пациента правильно, а срок годности используемых реагентов еще не истек.

На специальную пластину (или планшетку), на расстоянии друг от друга с помощью специальной пипетки наносят по 1 крупной капле каждого из антител (для удобства, лучше располагать их так – А, В, АВ). Возле каждой из капель цоликлонов необходимо поместить по одной капле исследуемой крови и при покачивании планшетки постепенно их перемешать.

Визуально, результаты исследования можно определить уже через 5-10 секунд после начала анализа. В исследуемой крови обнаруживаются так называемые “красные конгломераты” – склеившиеся эритроциты.

Образуются они в результате реакции агглютинации, т.е. в том случае, когда цоликлон соответствует антигену (в том числе и при исследовании на резус-фактор).

Если же агглютинации не наблюдается, то соответственно имеется расхождение между исследуемыми антигенами и имеющимися антителами.

Как проводится оценка результатов исследования и определение групповой принадлежности?

Как уже говорилось выше, результат исследования определяется по наличию реакции агглютинации визуально или с помощью анализаторов:

  • если ее нет ни в одной из капель, значит исследуемая кровь имеет первую группу.
  • когда она наблюдается в ячейке, где расположен цоликлон анти-А, значит в исследуемой крови содержится данный антиген. Таким образом, исследуемая кровь может быть как второй (генотип АА или А0) или 4 (АВ) групп.
  • если агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-В, то исследуемая кровь 3 (ВВ, В0) или 4 группы.

Для проверки правильности результатов на планшетке и добавляется цоликлон анти-АВ (обладающий свойством определять и резус-фактор). Он, в какой-то мере является контрольным, так как именно по наличию в нем агглютинатов судят о правильности проведенного анализа. Если реакция произошла во всех ячейках, значит исследуемый образец относится к 4 группе крови.

Возможна ситуация, когда агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-АВ, а в других образцах ее нет. В таком случае можно говорить о неправильно проведенном анализе, и проводят повторное определение группы и резус-фактора.

Что следует учитывать при проведении анализа

Чтобы результат анализа был максимально достоверным, при проведении процедуры необходимо соблюдать ряд условий:

  • реагенты должны храниться в холодном месте при температуре +2-8 градусов во флаконах с плотно закрученной крышкой (в случае нарушения правил хранения они быстро теряют свои свойства);
  • для проведения анализа нельзя использовать цоликлоны с истекшим сроком хранения (он составляет около 30 дней) или жидкости, которые содержат осадок, хлопья или мусор;
  • исследование выполняется в хорошо освещенном помещении при температуре воздуха не ниже +15 и не выше +25 градусов, причем в нем не должно быть грязи, пыли и других факторов, способных исказить результат;
  • при нанесении биоматериала и реагентов на поверхность планшетки следует точно соблюдать пропорции – если крови будет слишком много, реакцию сложнее отследить, а в противоположном случае (при малом объеме) она будет слишком медленной;
  • нельзя допускать, чтобы капли крови, смешанные с разными типами цоликлонов, сливались вместе – если это случилось, исследование проводят заново; по этой же причине для смешивания реагентов с биоматериалом следует использовать разные палочки.

Продолжительность реакции должна составлять не менее 3 минут, а при сомнительном результате время наблюдения за образцами биоматериала следует продлить до 5 минут. Однако по истечении 10 минут может произойти подсыхание биоматериала и естественное выпадение эритроцитов в осадок, поэтому доверять такому исследованию не стоит.

Реакция со стандартными эритроцитами

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.

  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.

  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными.

Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают.

Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Для чего проводится анализ

Группа и резус-фактор – генетически обусловленные характеристики крови, которые наследуются от родителей и остаются неизменными на протяжении всей жизни человека. Классификация групп крови осуществляется, исходя из определенного набора биохимических параметров и состава антигенов, и насчитывает 4 основных группы.

Переливание пациенту крови несовместимой группы или с другим резус-фактором несет с собой смертельную опасность – иммунная система начинает вырабатывать антитела против чужеродных клеток, которые атакуют и разрушают их.

Именно по этой причине в ситуациях, которые несут с собой риск обширной кровопотери, необходимо точное определение принадлежности крови и резус-фактора как у донора, так и у реципиента.

Определение группы крови и резус фактора

Практически сразу после рождения у ребенка берется анализ крови на группу крови и резус-фактор. Эти данные остаются неизменными на всю жизнь. Однако не всегда родители запоминают группу крови и резус малыша.

Следовательно, не могут их сообщить, когда ребенок повзрослеет. Поэтому многие люди самостоятельно сдают анализ на группу крови и Rh. Современная медицина предлагает несколько методов определения группы крови и резус-фактора.

Вот самые популярные из них.

Цоликлоны для определения группы крови и резуса

Узнать группу крови можно с помощью цоликлонов. Этот довольно новый метод позволяет получить практически 100% достоверный результат.

Цоликлонами называются моноклинальные антитела, которые синтезированы благодаря разработкам генной инженерии из жидкой ткани стерильных мышей. Они используются для того, чтобы выявить, какая группа у крови по системе АВО.

Такой вид анализа выполняется в условиях лаборатории. Для получения достоверного результата во время исследования должны быть соблюдены ряд правил. Прежде всего, температура воздуха в помещении, где проводятся анализы, не должна быть ниже +15 градусов по Цельсию и выше +25 градусов по Цельсию.

Также в лаборатории должно быть хорошее освещение. Для выполнения анализа используются только качественные реагенты. Они не должны иметь замутнения и содержать хлопья. Для каждого реагента должна быть применена отдельная пипетка, чтобы не допустить смешивание.

Алгоритм действия в данном случае будет следующим. На двух противоположных сторонах тарелки выполняются надписи анти-А и анти-В, под которые лаборант помещает по 0,1 мл соответствующего цоликлона. Определить их можно по оттенку.

Так, у цоликлона анти-А он желто-розовый, а анти-В – синий. Далее, под реагент помещается капля крови. С помощью стеклянной палочки обе субстанции смешиваются.

После этого берется чистая палочка, и такая манипуляция выполняется с двумя другими субстанциями.

Если же процесса агглютинации нет, то цоликлон приобретает красный цвет. После этого происходит определение группы крови:

  • Если агглютинация не идет ни с одной, ни с другой стороны тарелки, то в эритроцитах нет антигенов А и В, следовательно, кровь принадлежит к первой группе.
  • Если агглютинация происходит только там, где присутствовал цоликлон анти-А, то в форменных клетках крови (эритроцитах) присутствует лишь антиген А. Следовательно, кровь принадлежит второй группе.
  • Если агглютинация происходит только там, где присутствовал цоликлон анти-В, то в форменных клетках крови (эритроцитах) присутствует лишь антиген В. Следовательно, кровь принадлежит к третьей группе.
  • Если процесс агглютинации идет в обоих случаях, то в эритроцитах есть антигены А и В. В такой ситуации рекомендуется сделать дополнительный анализ. Для его проведения берется капля крови пациента и смешивается с изотоническим раствором хлорида натрия в количестве 0,1 мл. Если при этом агглютинация не наблюдается, то определяют четвертую группу крови.

Данным методом можно также определить резус-фактор. Алгоритм будет таким же, как и при определении группы крови.

На белую тарелку помещается цоликлон анти-D, а рядом с ним капля крови пациента. Она должна быть в 10 раз меньше реагента. Обе субстанции смешиваются и в том случае, если агглютинация началась, то определяется положительный резус-фактор, в том случае, если нет, то резус-фактор отрицательный.

Методика определение группы крови по системе АВО

Как определить группу крови по системе АВО? Методика распознания группы крови и резус-фактора по системе АВО не менее популярна, чем предыдущая. Исследование также проводится в лабораторных условиях. Техника выполнения анализа по системе АВО проста.

К ним добавляются капли крови, размеров раз в 10 меньше. Затем, субстанции смешиваются, и наблюдается реакция. Спустя 5 минут, лаборант может начать расшифровку. Оценивается агглютинация, при которой возникают хлопья, а сыворотка становится бесцветной.

Метод АВО выдает такие результаты:

  • агглютинации нет нигде, следовательно, у человека первая группа крови;
  • агглютинация идет в сыворотках О и В, значит, кровь 2 группы;
  • агглютинация идет в сыворотках О и А, значит, кровь 3 группы;
  • агглютинация идет во всех сыворотках АВО, значит, требуется дополнительное исследование, в котором будет задействована сыворотка для определения четвертой группы. Если в данном случае процесс агглютинации не состоялся, значит, исследуемая кровь относится к 4 группе.

Источник: https://obsleduem.net/all/opredelenie-gruppy-krovi-po-coliklonam/

Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ

Точное определение группы крови цоликлонами

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?

цоликлон анти-А;

цоликлон анти-В;

цоликлон анти-D;

– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

 Расшифровка результатов определения группы крови

  • если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
  • если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.

AB (IV)

Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

  • если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
  • если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)

AB (IV)Rh-

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

  • Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
  • Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стеклянные палочки
  1. Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
  2. Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
  3. Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать.

Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин.

При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV).

Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.

  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.

  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными.

Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при  реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают.

Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Источник: https://anest-rean.ru/gruppa-krovi/opredelenie/

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.